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【论文分享】抗生素诱导革兰阴性杆菌释放内毒素的实验研究(一)

发布时间:2019-10-17
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关键词:

抗生素、细菌内毒素感染、鲎试剂、厦门鲎生科产品介绍。


摘要:

实验论文包括实验目的、实验方法、实验结果和实验结论四部分。


徐能武 袁建成 肖光夏 郑江 秦孝建

迄今为止,感染尤其是革兰阴性(G-)杆菌感染导致的脓毒症及脓毒性休克,仍是严重烧伤、创伤患者的主要死亡原因之一[1,2],而抗生素的使用是治疗G-菌感染的重要手段。但近年来的研究表明[3- 6]:应用某些敏感抗生素治疗G-菌感染时,虽能有效杀灭细菌,却同时诱导G-菌释放大量内毒素(lipopolysaccharide, LPS),其诱导力因抗生素的种类不同而异。LPS是烧伤脓毒症及脓毒性休克发病机制中的关键致病因子,但目前尚无可供临床实用的LPS拮抗剂[7,8],因此不同抗生素诱导G-菌释放LPS能力的差异,最终将影响到治疗效果。本实验选择目前临床上G-菌感染中2种主要的致病菌绿脓杆菌和大肠杆菌,同时选择最常用的3类抗生素:β-内酰胺类、喹诺酮类及氨基糖甙类,观察其对体外绿脓杆菌和大肠杆菌的杀菌效能、细菌形态学变化、诱导细菌释放LPS能力等,为临床治疗G-菌感染时,正确选择抗生素提供实验依据。


材料与方法

一、材料

1。细菌:绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa103,PA103)和大肠杆菌(Escherichia coli 25922,E。coli 25922),由第三军医大学微生物教研室提供。


2.抗生素:亚胺培南(Imipenem, IMP),美国默克公司默沙东药厂,批号V5134。头孢他啶(Cef-tazidime, CTZ),英国葛兰素威康公司,批号B4166GA。培福新(Pefloxacine, PFX),法国罗钠普朗克公司乐安制药厂,批号114。硫酸丁胺卡那霉素注射液(Amikacin sulfate Injection, AMN),上海旭东海普药业有限公司,批号970307。


3.试剂:(1)鲎试验专用鲎试剂,厦门鲎试剂生物科技,批号980225;鲎试剂溶解水,厦门鲎试剂生物科技,批号980125。


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注:实验方法此处省略,如有需要可联系我司获取。



省略部分实验结果)

实验结果


1.抗生素孵育后细菌菌量变化:(1)除0。5 MIC外,4种抗生素分别以终浓度1、5、10MIC作用于绿脓杆菌,各时相点细菌菌量与对照组相比明显减少,其中以IMP杀菌作用最快,CTZ和PFX次之,AMN较差,但4种抗生素之间差异无统计学意义,见图1。(2)4种抗生素分别以0.5、1、5、10 MIC终浓度作用于大肠杆菌,杀菌曲线的变化趋势及抗生素杀菌效能间的差异与PA103组相似。


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2.抗生素诱导细菌释放LPS的变化:(1)对照组:随着孵育时间的延长,两种细菌自发释放LPS的量逐渐增加,各个时相点大肠杆菌的LPS水平明显高于绿脓杆菌,两者间的差异有显著或非常显著性意义(P< 0.05~ 0.01,表1)。(2)抗生素组:当4种抗生素以0.5、1、5和10 MIC浓度分别作用于两种细菌后,均可影响细菌LPS的释放,其诱导力与抗生素的种类、浓度、作用时间及菌种有关。


3.抗生素种类和作用时间的影响:当4种抗生素浓度和作用时间相同时,细菌释放LPS的诱导力为:CTZ> PFX> IMP> AMN。随着抗生素作用时间的延长,诱导细菌释放LPS的量也逐渐增加,但各时相点释放的速率并不相同(图2)。


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部分参考文献

1 Glauser M P, Heumann D, Baumgartner J D, et al. Pathogenesisand potential strategies for prevention and treatment of septicshock: an update. Clin Infect Dis,1994,18:S205- 216.

2 Holzheimer RG,Hirte J F, Reith B,et al.Different endotoxin re-lease and IL- 6 plasma levels after antibiotic administration in sur-gical intensive care patients. J Endotoxin Res,1996,3:261- 267.

3 Jackson J J, Kropp H.Differences in mode of action ofβ- lactamantibiotics influence morphology, LPS release and in vivo antibioticefficacy. J Endotoxin Res,1996,3:201- 218.

4 Healy DP, Verst- Brasch CL, Clendening CE, et al。 Influence ofdrug class and dose size on antibiotic- induced endotoxin/ IL- 6release and impact on efficacy of anti- endotoxin antibody。J Endo-toxin Res,1996,3:219- 227。

5 Prins JM。Antibiotic induced release of endotoxin- clinical date andhuman studies。 J Endotoxin Res,1996,3:269- 273。

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